液相色譜儀的發展并不局限

　　液相色譜儀檢測器適用于血藥濃度的檢測器有紫外線吸收，熒光發射和電化學三種。 液相色譜儀紫外檢測器應用于對紫外光有吸收的藥物，大多數藥物分子對紫外光有吸收，故能較普遍采用，檢測限有0.1μg左右。紫外檢測器有固定波長型、可變波長型及掃描器，既能使流動相停流作組分的定性定量檢測，又能提高測定靈敏度，重現性較好。熒光發射檢測器對能產生熒光的藥物才能使用。80年代應用激光替代氙燈光源，光強度增加了3~4倍，對某些藥物的檢測限可達pg級。電化學檢測器是由一個碳糊或破碳做成的蒲層電解池。常用于檢測兒茶酚胺類及有酚類基團的各種藥物和代謝物。流出組分進入2μl的薄層電解池，在一暄電壓下電解產生電流，放大后檢測，檢測限pg級。

　　液相色譜儀的化學鍵合固定相是利用化學反應將有機分子鍵合到載體表面上，形成均一、牢固的單分子液膜。特點如下：

　　1、固定相不易流失，柱的穩定性和壽命較高。

　　2、能耐受各種溶劑，可用于梯度洗脫。

　　3、表面較為均一，沒有液坑，傳質快，柱效高。

　　4、能鍵合不同基團以改變其選擇性。如鍵合氰基和氨基等極性基團用于正相色譜，鍵合C2、C4、C6、C8、C18、C22烷基和苯基等非極性基團用于反相色譜，鍵合離子交換基團用于離子色譜等。

　　因此，化學鍵合固定相是液相色譜儀較為理想的固定相。

　　液相色譜儀的系統由儲液器、泵、進樣器、色譜柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成。儲液器中的流動相被高壓泵打入系統，樣品溶液經進樣器進入流動相，被流動相載入色譜柱(固定相) 內， 由于樣品溶液中的各組分在兩相中具有不同的分配系數， 在兩相中作相對運動時， 經過反復多次的吸附- 解吸的分配過程， 各組分在移動速度上產生較大的差別， 被分離成單個組分依次從柱內流出， 通過檢測器時， 樣品濃度被轉換成電信號傳送到記錄儀，數據以圖譜形式打印出來。

　　液相色譜儀流動相的洗脫方式配好經脫氣的流動相放于貯液瓶中，經過有濾過頭、內徑2mm的聚四氟乙烯管流入高壓泵進入色譜柱，zui后自檢測器流出或收集或作廢液回收。用流動相洗脫的方式有恒溶劑脫洗法(isocratic dlution)，即自洗脫開始到結束，溶劑的配比恒定。另一類為梯度洗脫法(gradicnt clution),即使溶劑的極性強度在色譜過程中逐漸增加。須按一定程序不斷改變流動相的濃度配比，從而使同一個試樣中組分性質相差較小的及較大的都能在一次色譜過程中很好分離，而整個液相色譜儀色譜過程縮短。必須注意，梯度洗脫法不能用于分子排阻色譜及用電化學檢測的反相液相色譜法中。