大豆脂肪酸組分的氣相色譜分析

　　摘要:探討了大豆脂肪酸快速氣相色譜分析方法，不需從原料中提取脂質，直接將磨碎原料中的脂質皂化、甲脂化后， 利用色譜柱進行氣相色譜分析。結果表明：軟脂酸、硬脂酸、油酸、亞油酸和亞麻酸的出峰時間依次為 6 57、7. 83 8. 73 & 86、9. 06 mi。這種方法的優點是快速、操作方便、節省藥品；即使在較低的雜交世代樣品很少，用普 通法不易提取脂質時，此法也能順利地完成分析工作。 關鍵詞：大豆;脂肪酸;氣相色譜分析
　　　　解浸提，取上清甲酯化，采用醇鉀作為甲酯化試劑， 酯化反應速度快并酯化*，甲酯化后離心取上清 用HP5色譜柱進行GC分析，獲得了 一種快速檢測 大豆脂肪酸組分的氣相色譜分析法。
　　材料與方法
　　儀器和試劑
　　氣相色譜。 標準品：軟脂酸（> 99% ）、硬脂酸（> 99% ）、亞 油酸、油酸、亞麻酸（>99. 3%,購于Sgm a公 司 ）。
　　試齊…正己烷（> 97% , AR）甲醇（
　 1. 2甲酯化試劑制備
　　取分析純氫氧化鉀2 244 g放入帶磨口的棕色 試劑瓶中，取100 mL甲醇沿玻璃棒注入試劑瓶中，
　　大豆油脂是由脂肪酸和甘油組成，其中脂肪酸 占油脂總量的90%以上，是油脂的主要成分。大豆 油脂的特性與其所含不飽和脂肪酸的組成與配比 有關。大豆油脂不飽和脂肪酸中所含的亞油酸 （18： 2）和亞麻酸（18： 3）是哺乳動物自身不能合成 的，該重要營養物質必須從植物油脂中獲得。大 豆是亞油酸含量較高的油用作物，可防止血清中膽 固醇的增加和沉積，軟化血管，對防治高血壓和心 血管疾病均有重要作用。亞麻酸對維持細胞膜的 穩定性和調節細胞膜適應性具有極其重要的生物 學意義。大豆脂肪酸均采用色譜分析法測定，但不同研究者所采用的進樣樣品前處理方法和酯化試 劑不同。前人分析大豆脂肪酸組分，通常采用索氏 抽提法或二氧化碳臨界萃取法先提取脂肪提 取脂肪要浪費大量的時間，提取脂肪后再使用有機 溶劑溶解脂肪。現對Ssana等方法進行了改進， 將磨碎原料中的脂質不進行提取直接用正己烷溶
　　　　用玻璃棒攪拌3mn在室溫下反應2 h后，待用，如 不用立即放于4。C冰箱中保存，可使用3 d。 1. 3樣品處理
　　稱取0 33g已粉碎的大豆樣品于L 5mL的離 心管中，加入ImL正己烷，充分振搖0. 5min室溫 放置5 I;然后將上清液移入另一只1 5 mL離心管 中，在上清離心管加入已配好的0 5mL甲酯化試 劑進行甲酯化反應，振蕩2min在室溫下反應1h。 移上清，在6 000 I- mil- 1離心機離心5 m in然后 上清進樣GC分析。 14 GC分析條件
　　色譜柱 HP519091J-413 （ 30m x 320Um x 0. 25Um）;進樣量1UL，分流進樣方式，分流比50: 1; 進樣口溫度：220°C；載氣：Nq 45 mL ‘ mn ?氫氣： 40 mL‘ min-1;空氣 450mL ‘ mh- 1。程序升溫： 150°C下保持Imin然后以20°0 m if1的速率升 至200°C，保持3 min再以10°C ‘ min-1的速率升至 250。C，保持2 mi。檢測器：氫火焰離子檢測器 （FD），檢測器溫度恒溫275。C。
　　結果與分析
　　與傳統方法比較
　　運用毛細管氣相色譜進行分離，經甲酯化的脂 肪酸成分，通過色譜數據工作站689Q利用峰面積 歸一化法，測得各化學組分在脂肪酸中的百分含 量。該方法快速、操作方便、節省藥品；即使在較低 的雜交世代樣品很少，用普通法不易提取脂質時， 此法也能順利地完成分析工作。